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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:血液基因組DNA小量提取試劑盒(0.1-1ML)

  • 產(chǎn)品型號(hào): 200T
  • 產(chǎn)品廠商:通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格:1495
  • 產(chǎn)品庫存:136
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
血液基因組DNA小量提取試劑盒(0.1-1ML)本試劑盒適用于各種新鮮及抗凝劑(檸檬酸鈉、EDTA 等)處理過的全血基因組 DNA 大量提取。DNA 特異吸附到硅膠膜上,通過簡單漂洗去除雜質(zhì),可快速純化得到基因組 DNA 。使用本試劑盒得到的血液基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染,可直接進(jìn)行 PCR 、 酶切和雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
詳情介紹:


血液基因組DNA小量提取試劑盒(0.1 - 1 m L)
產(chǎn)品及特點(diǎn)
試劑盒適用于各種新鮮及抗凝劑(檸檬酸鈉、EDTA 等)處理過的全血基因組 DNA 大量提取。DNA 特異吸附到硅膠膜上,通過簡單漂洗去除雜質(zhì),可快速純化得到基因組 DNA 。使用本試劑盒得到的血液基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染,可直接進(jìn)行 PCR 、 酶切和雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。


它具有下列特點(diǎn):
1. 適用范圍廣:可從抗凝血、白膜層和禽類血等樣品中直接提取DNA;
2. 操作簡便:無需有機(jī)試劑沉淀,可快速獲得高純度的血液基因組DNA;
3. 純度高:去除污染物和抑制劑徹底,便于下游應(yīng)用。

成分規(guī)格

Buffer GL

12ml

25ml

50ml

Buffer EB

10ml

10ml

30ml

Buffer W1(concentrate)

13ml

26ml

52ml

Buffer W2(concentrate)

15ml

30ml

60ml

Proteinase K

1ml

2×1ml

4×1ml

Spin Columnwith Collection Tubes

50套

100套

200套

蛋白酶K 于-20℃, 其他組分室溫(15 - 25℃) , 可保存 12 個(gè)月

本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于其它用途


使用方法
自備試劑
無水乙醇、RNase A(可選)。

注 意:使用前請(qǐng)先在緩沖液 Buffer W1 和 Buffer W2 中加入無水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽)
1. 在1.5 ml 滅-菌離心管中加入 20 μl Proteinase K,200 μl 哺乳動(dòng)物鮮血或抗凝血。(注意:如果處理血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級(jí)生物的抗凝血液,其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞,因此處理量 5-15 μl,可加緩沖液 PBS 或生理鹽水補(bǔ)足 200 μl 后進(jìn)行下面的裂解步驟,如要去除RNA,可加入 4 μl RNase A(100 mg/ml),混勻,靜置 5 min)
2. 加入 200 μl Buffer GL,渦旋混勻 15 sec,56℃水浴 10 min。
注 意:期間每隔一段時(shí)間震蕩離心管,至溶液變得清亮)
3. 加入 200 μl 無水乙醇,充分震蕩,短暫離心以去除管蓋內(nèi)壁液體。
4. 將吸附柱放入收集管,將上一步所得溶液全部加入吸附柱中,12,000 rpm離心1min,棄收集管中濾液。
5. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl Buffer W1,室溫 12,000 rpm 離心30 sec,棄收集管中濾液。(注 意:按要求在 Buffer W1 中加入無水乙醇,用后及時(shí)蓋緊,以防乙醇揮發(fā))
6. 向吸附柱內(nèi)加入 600 μl Buffer W2,室溫 12,000 rpm 離心30 sec,棄收集管中濾液。(注 意:Buffer W2 是濃縮液,按要求加入無水乙醇,用后及時(shí)蓋緊,以防乙醇揮發(fā))
7. 向吸附柱內(nèi)加入 500 μl Buffer W2,室溫 12,000 rpm 離心30 sec,棄收集管中濾液。

8. 干燥。將離心吸附柱于 12,000 rpm 離心 2 min,甩干殘留漂洗液。

注 意:此步不能省略,否則殘留乙醇會(huì)影響基因組 DNA 的后續(xù)使用)
9. 將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 塑料離心管(自備)中,加入50 - 100 μl Buffer EB,室溫放置 2 min,12,000 rpm 離心 1 min,離心管底溶液即基因組DNA。
注 意:為增加洗脫效率,可將洗脫液 Buffer EB 在 60℃預(yù)熱。如需使用去離子水洗脫,可用NaOH調(diào)整其pH值在7.0 - 8.5之間,為了增加回收率,可將得到的溶液重新加入到吸附柱中,室溫放置2min,再次離心收集)

注意事項(xiàng)
1. 如 Buffer GL,Buffer W1 產(chǎn)生沉淀,可在 56℃水浴溶解。
2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的 DNA 片段小,提取量下降。
3. 所有離心步驟均為臺(tái)式離心機(jī),室溫下操作。

血液基因組DNA小量提取試劑盒(0.1 - 1 m L)
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