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ELISA實(shí)驗(yàn)的樣本為什么都要進(jìn)行稀釋工作
日期：2024-12-22 23:27
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摘要：ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的進(jìn)程：
先把蛋白稀釋必定的倍數(shù)，比如說(shuō)10倍、20倍稀釋（這樣可以大體判定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用必定稀釋度的陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清進(jìn)行孵育后洗刷，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。
ELISA試劑盒很多人都是知道的...
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的進(jìn)程：
先把蛋白稀釋必定的倍數(shù)，比如說(shuō)10倍、20倍稀釋（這樣可以大體判定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用必定稀釋度的陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清進(jìn)行孵育后洗刷，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。
ELISA試劑盒很多人都是知道的，那你知道嗎，其實(shí)每一份ELISA試劑盒里邊都有著一份說(shuō)明書，里邊介紹了樣本稀釋的份額。這時(shí)候就有很多人就要問(wèn)了，為什么ELISA實(shí)驗(yàn)的樣本都要進(jìn)行稀釋作業(yè)？
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋？有兩個(gè)原因：
1）比賽按捺比較明顯，應(yīng)稀釋比賽物；
2）以下降非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。
血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當(dāng)然假設(shè)你嫌費(fèi)事我覺(jué)得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽，血清的稀釋倍數(shù)必定要事前判定，但也不必一點(diǎn)點(diǎn)，你做一個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù)，即你的比賽ELISA中陰性孔OD在1.0，這樣作出來(lái)的曲線比較靈敏。
先把蛋白稀釋必定的倍數(shù)，比如說(shuō)10倍、20倍稀釋（這樣可以大體判定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用必定稀釋度的陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清進(jìn)行孵育后洗刷，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。
ELISA試劑盒很多人都是知道的，那你知道嗎，其實(shí)每一份ELISA試劑盒里邊都有著一份說(shuō)明書，里邊介紹了樣本稀釋的份額。這時(shí)候就有很多人就要問(wèn)了，為什么ELISA實(shí)驗(yàn)的樣本都要進(jìn)行稀釋作業(yè)？
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋？有兩個(gè)原因：
1）比賽按捺比較明顯，應(yīng)稀釋比賽物；
2）以下降非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。
血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當(dāng)然假設(shè)你嫌費(fèi)事我覺(jué)得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽，血清的稀釋倍數(shù)必定要事前判定，但也不必一點(diǎn)點(diǎn)，你做一個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù)，即你的比賽ELISA中陰性孔OD在1.0，這樣作出來(lái)的曲線比較靈敏。