細胞的主要用途和優(yōu)點

主要用途

1.應用案例

采用199(SLM)、MEM(SLM)和DMEM（SLM）低血清培養(yǎng)基分別培養(yǎng)Vero細胞、BHK21細胞和CHO細胞，新生牛血清用量可以從10％降至3％，減少新生牛血清使用批次和批間差的影響，減少生物制品純化損失，減少由于不確定蛋白或者其它血清組分帶來干擾和差異的風險，提高制品**性。低血清培養(yǎng)基可以在方瓶、3L轉瓶、15L 轉瓶及生物反應器中培養(yǎng)細胞，在疫苗生產中可以達到低血清高密度的培養(yǎng)效果。
低血清培養(yǎng)基營養(yǎng)成分優(yōu)于基礎培養(yǎng)基，易使細胞增殖迅速，代謝旺盛，代謝產物對細胞有影響，易產生細胞老化脫落現(xiàn)象。因此需要適當增加換液次數(shù)，增加傳代頻率。獲取同樣的細胞量，用低血清培養(yǎng)基將比用傳統(tǒng)培養(yǎng)基縮短近1/3 的時間，可提高生產效率。
采用199(SLM)低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細胞分泌狂犬疫苗病毒，滴度明顯高于采用199 培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)獲得的滴度。采MEM(SLM)低血清培養(yǎng)基BHK21細胞，在本實驗情況下12 代內細胞形態(tài)和致密度均優(yōu)于MEM培養(yǎng)基傳統(tǒng)培養(yǎng)情況，因而可以預期其產生的口蹄疫、甲肝等疫苗生產的病毒產量將提高。低血清培養(yǎng)基用于反應器Vero細胞狂犬疫苗的生產，實踐證明效果良好。采DMEM（SLM）低血清培養(yǎng)基添加1％小牛血清在轉瓶中培養(yǎng)CHO細胞生產EOP，可提高收液次數(shù)，每次收液表達量明顯提高。

2.概述

無血清培養(yǎng)基是用來在無血清條件下生長特殊類型的細胞或進行專門應用的培養(yǎng)基。一般是由基礎培養(yǎng)基和替代血清的補充因子組成。無血清培養(yǎng)基中沒有添加血清，但含有個別蛋白或大量蛋白組分。無血清培養(yǎng)基與無蛋白培養(yǎng)基的區(qū)別在于培養(yǎng)基中沒有添加蛋白，但含有一些動物或植物來源成分，如低分子量肽的水解物。還有一種化學限定培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中不含有蛋白、水解產物或未知結構的組分，所有成分均有已知的化學結構。

3.優(yōu)點：

1） 未知組分少；
2） 培養(yǎng)基中不存在血清中的抗體、補體等成分，對培養(yǎng)細胞影響??；
3） 雜蛋白含量少，生產的產品后期處理較容易，例如疫苗生產由于人用疫苗需要純化減少雜蛋白，純化過程中成本消耗很大，疫苗的損失也很大；
4） 無血清培養(yǎng)既可以實現(xiàn)細胞的大規(guī)模懸浮培養(yǎng)，增加培養(yǎng)液的利用率，可以采用發(fā)酵罐培養(yǎng)減少了人力消耗。