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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)相關(guān)問題解答

日期:2024-12-22 11:39
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摘要:1、問:ELISA試劑盒做間接ELISA試劑盒法測(cè)試小鼠血清中的IgE抗體,設(shè)空白對(duì)照、和陰性對(duì)照、陽性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬、10萬、20萬不等,用的是生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體,和親和素的辣根過氧化物酶??墒墙Y(jié)果除了空白對(duì)照孔沒有顏色外,其余各孔全有顏色,而且OD值都相差不大,為什么? 回答:可能原因如下: (1) 水質(zhì)被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。 (2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔,充分洗滌。 (3) 移液頭重復(fù)使用,未洗凈或不完全; 防止辦法移液頭一次性使用。 (4) 酶標(biāo)板靈敏度過高。 (5) 一抗顯色時(shí)間的控制等等,關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。 2、ELISA試劑盒加樣時(shí)的防錯(cuò)小經(jīng)驗(yàn) (1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比如報(bào)紙,墊在下面,這樣,加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會(huì)變小,沒加的字正常,非常容易區(qū)分。 (2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別 (3)在標(biāo)本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也可以加以區(qū)分
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)相關(guān)問題解答
1、問:ELISA試劑盒做間接ELISA試劑盒法測(cè)試小鼠血清中的IgE抗體,設(shè)空白對(duì)照、和陰性對(duì)照、陽性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬、10萬、20萬不等,用的是生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體,和親和素的辣根過氧化物酶。可是結(jié)果除了空白對(duì)照孔沒有顏色外,其余各孔全有顏色,而且OD值都相差不大,為什么?

回答:可能原因如下:
(1) 水質(zhì)被金屬離子等污染;防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
(2) 洗滌不充分,樣品中其它成分殘留或酶殘留;防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔,充分洗滌。
(3) 移液頭重復(fù)使用,未洗凈或不完全; 防止辦法移液頭一次性使用。
(4) 酶標(biāo)板靈敏度過高。
(5) 一抗顯色時(shí)間的控制等等,關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。

2、ELISA試劑盒加樣時(shí)的防錯(cuò)小經(jīng)驗(yàn)
(1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比如報(bào)紙,墊在下面,這樣,加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會(huì)變小,沒加的字正常,非常容易區(qū)分。
(2)可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別

(3)在標(biāo)本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也可以加以區(qū)分

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