血磷濃度測(cè)試盒
測(cè)定方法: 微量法
測(cè)定規(guī)格: 100T/96S
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個(gè)月
注 意: 正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義:
血磷主要指血中的無機(jī)磷,以無機(jī)磷鹽的形式存在。血漿中鈣、磷濃度關(guān)系密切,在以mg/dL表示時(shí),二者的乘積([Ca]×[P])為30~40。當(dāng)([Ca]×[P])>40,則鈣和磷以骨鹽形式沉積于骨組織;若([Ca]×[P])<35則妨礙骨的鈣化,甚至可使骨鹽溶解,影響成骨作用。血鈣和血磷含量的相對(duì)穩(wěn)定依賴于鈣、磷的吸收與排泄和鈣化及脫鈣兩種代謝的相對(duì)平衡。上述平衡受到維生素D3、甲狀旁腺素和降鈣素等的調(diào)節(jié)。
測(cè)定原理:
去除血清中有機(jī)磷后,無機(jī)磷鹽與鉬酸銨試劑生成磷鉬酸,被硫酸亞鐵還原后呈藍(lán)色,在620nm有光吸收;通過測(cè)定620 nm吸光度,計(jì)算血液中磷含量。
自備儀器和用品:
離心機(jī)、可調(diào)式移液槍、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水。
血磷濃度測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到620 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 取出標(biāo)準(zhǔn)液,室溫解凍。
3. 血清預(yù)處理:吸取50 μL血清,加950μL試劑一,混勻后室溫8000rpm,離心10min,取上清液,待測(cè)。
4. 空白管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入50μL蒸餾水,50μL試劑一,100μL試劑三,混勻后靜置10min,于620 nm測(cè)定吸光度,記為A空白管。
5. 標(biāo)準(zhǔn)管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入50μL標(biāo)準(zhǔn)液,50μL試劑一,100μL試劑三,混勻后靜置10min,于620 nm測(cè)定吸光度,記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
6. 測(cè)定管:取微量石英比色皿/96孔板,依次加入50μL上清液,50μL試劑一,100μL試劑三,混勻后靜置10min,于620 nm測(cè)定吸光度,記為A測(cè)定管。
注意:空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
