海藻糖6磷酸酯酶(TPP)測試盒
測定方法: 分光光度法
測定規(guī)格: 50管/24樣
保存條件: 低溫避光保存
有 效 期: 6個月
注? 意: 正式測定前務(wù)必取 2-3 個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義:
海藻糖又稱為漏蘆糖、蕈糖,是由兩個葡萄糖分子組成的一個非還原性雙糖,能夠在高溫、高寒、高滲透壓及干燥失水等惡劣環(huán)境條件下在細(xì)胞表面形成獨(dú)特的保護(hù)膜,有效地保護(hù)生物分子結(jié)構(gòu)不被破壞,從而維持生命體的生命過程和生物特征。
植物體內(nèi)主要以葡萄糖為底物合成海藻糖,海藻糖-6-磷酸酯酶 (trehalose 6-phosphate phosphatase,TPP)是該途徑中海藻糖合成關(guān)鍵酶之一,該反應(yīng)首先在海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)的作用下,催化尿苷二磷酸葡萄糖(UDPG)和 6-磷酸葡萄糖生成中間產(chǎn)物6-磷酸海藻糖,再在TPP的作用下去磷酸化,生成海藻糖。
測定原理:
TPP 催化海藻糖-6-磷酸產(chǎn)生海藻糖,同時釋放出磷酸根,使用鉬銻抗比色法測定。
需自備的儀器和用品:
分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿 、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體 60mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 10mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 6mL×1 支,4℃保存。
試劑三: 粉劑×1 支,4℃避光保存。臨用前加 2mL 蒸餾水溶解。用不完的試劑 4℃保存。
試劑四: 粉劑×3 支,4℃避光保存。臨用前加 1mL 蒸餾水溶解?，F(xiàn)配現(xiàn)用。