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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱: 精液基因組DNA提取試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào): 200T
  • 產(chǎn)品廠商:通蔚生物
  • 產(chǎn)品價(jià)格:1978
  • 產(chǎn)品庫(kù)存:117
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
精液基因組DNA提取試劑盒本試劑盒適用于精液基因組 DNA 的提取。試劑盒采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解體系降解蛋白,結(jié)合硅膠膜特異吸附核酸的原理,可快速純化得到高質(zhì)量的基因組DNA。使用本試劑盒得到的基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染,可直接進(jìn)行PCR、酶切和雜交等相關(guān)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
詳情介紹:
產(chǎn)品及特點(diǎn)
試劑盒適用于精液基因組 DNA 的提取。試劑盒采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解體系降解蛋白,結(jié)合硅膠膜特異吸附核酸的原理,可快速純化得到高質(zhì)量的基因組DNA。使用本試劑盒得到的基因組 DNA 無蛋白、核酸酶污染,可直接進(jìn)行PCR、酶切和雜交等相關(guān)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

它具有下列特點(diǎn):
1. 簡(jiǎn)便快速,可快速獲得高純度的基因組 DNA;
2. 重復(fù)性好,產(chǎn)量高;
3. 完全去除污染物和抑制劑,便于下游應(yīng)用。


成分規(guī)格

Buffer GL

12ml

25ml

50ml

Buffer GTL

12ml

25ml

50ml

Buffer W1(concentrate)

13ml

26ml

52ml

Buffer W2(concentrate)

15ml

30ml

60ml

Buffer EB

10ml

10ml

30ml

Proteinase K

1ml

2×1ml

4×1ml

Spin Column with Collection Tubes

50套

100套

200套

蛋白酶 K 于-20℃ ,其他組分室溫(15 - 25℃),可保存12 個(gè)月

本產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于其它用途


使用方法
自備試劑
DTT、無水乙醇、RNase A(可選)。
注 意:Buffer W1 和 Buffer W2 為濃縮液,按要求加入無水乙醇,用后及時(shí)蓋緊,以防乙醇揮發(fā))
1. 吸取 50-100ul 新鮮或冷凍精液,加入200 ul Buffer GTL,再加入1MDTT30 ul混勻。
2. 加入 20 ul Proteinase K 溶液,充分混勻,在 56℃放置,直至組織完全溶解。
3. 加入 200 ul Buffer GL,充分混勻,70℃水浴或金屬浴處理10 min,期間每隔一段時(shí)間震蕩離心管,溶液變得清亮后短暫離心,以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。
注 意:Buffer GL 加入時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生白色沉淀,一般70℃時(shí)會(huì)消失,不影響后續(xù)實(shí)驗(yàn),如溶液未變清亮,說明細(xì)胞裂解不徹底,可能導(dǎo)致提取的DNA量少或者提取的DNA不純)
4. 加入 200 ul 無水乙醇,充分震蕩,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀,短暫離心以去除管蓋內(nèi)壁水珠。
5. 將所得溶液和絮狀沉淀轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12,000 rpm 離心30 sec,棄收集管中的濾液。
6. 向吸附柱內(nèi)加入 500 ul Buffer W1,室溫12,000 rpm離心30 sec,棄收集管中濾液。

注 意:Buffer W1 為濃縮液,按要求加入無水乙醇,用后應(yīng)立即蓋緊瓶蓋以防酒精揮發(fā))

7. 向吸附柱內(nèi)加入 600 ul Buffer W2,室溫 12,000 rpm 離心30 sec,棄收集管中濾液。
注 意:Buffer W2 為濃縮液,按要求加入無水乙醇,用后應(yīng)立即蓋緊瓶蓋以防酒精揮發(fā))

8. 向吸附柱內(nèi)加入 500 ul Buffer W2,室溫 12,000 rpm 離心2min,棄收集管中濾液。

9. 將離心吸附柱置于一個(gè)新的 1.5 ml 塑料離心管(自備)中,加入50 - 100 ul Buffer EB,室溫放置 2 min。10,000 rpm 離心 1 min,離心管底溶液即基因組DNA。

注 意:為增加洗脫效率,可將洗脫液在 60℃預(yù)熱。如需使用去離子水洗脫,可用NaOH調(diào)整其pH值在 7.0 - 8.5 之間,為了增加基因組 DNA 回收率,可將得到的溶液重新加入到離心管中,室溫放置2 min,再次離心收集)

注意事項(xiàng)
1. 如 Buffer GTL 和 Buffer GL 產(chǎn)生沉淀,可在 56℃水浴溶解。
2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的 DNA 片段小,提取量下降。
3. 所有離心步驟均為臺(tái)式離心機(jī),室溫下操作。
4. 按要求在 Buffer W1/W2 中加入無水乙醇。
精液基因組DNA提取試劑盒

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