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如何避免ELISA實(shí)驗(yàn)中基質(zhì)效應(yīng)

日期:2024-12-22 03:37
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摘要:什么是基質(zhì)效應(yīng)呢? 首先我們要知道什么是基質(zhì),基質(zhì)是指樣品中目標(biāo)分析物以外的部分。由于基質(zhì)成分會(huì)對(duì)分析過(guò)程有顯著干擾,影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。業(yè)內(nèi)把這些影響統(tǒng)稱為基質(zhì)效應(yīng)。這是ELISA試劑盒開(kāi)發(fā)和使用中需要避開(kāi)的雷。 如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢? 當(dāng)單個(gè)樣本或少量樣本值低于空白值時(shí),可能是實(shí)驗(yàn)操作出現(xiàn)問(wèn)題,這時(shí)應(yīng)增加重復(fù),進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于空白值時(shí),應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響,建立校正曲線予以修改。 基質(zhì)效應(yīng)的原因錯(cuò)綜復(fù)雜,有可能是樣品中存在的基質(zhì)導(dǎo)致原抗體的聯(lián)絡(luò)結(jié)合能力下降,便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。導(dǎo)致樣本值無(wú)法計(jì)算出數(shù)值,或許數(shù)值為負(fù)。 那我們?nèi)绾伪苊釫LISA實(shí)驗(yàn)中基質(zhì)效應(yīng)? 基質(zhì)效應(yīng)可以通過(guò)產(chǎn)品研發(fā)階段的優(yōu)化盡可能去消除的。通蔚生物針對(duì)ELISA產(chǎn)品研發(fā)進(jìn)行了多種優(yōu)化。ELISA試劑盒在開(kāi)發(fā)進(jìn)程中,標(biāo)準(zhǔn)品不選用人或動(dòng)物血清、血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的稀釋液,只能選用其仿照物。
什么是基質(zhì)效應(yīng)呢?
首先我們要知道什么是基質(zhì),基質(zhì)是指樣品中目標(biāo)分析物以外的部分。由于基質(zhì)成分會(huì)對(duì)分析過(guò)程有顯著干擾,影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。業(yè)內(nèi)把這些影響統(tǒng)稱為基質(zhì)效應(yīng)。這是ELISA試劑盒開(kāi)發(fā)和使用中需要避開(kāi)的雷。
如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢?
當(dāng)單個(gè)樣本或少量樣本值低于空白值時(shí),可能是實(shí)驗(yàn)操作出現(xiàn)問(wèn)題,這時(shí)應(yīng)增加重復(fù),進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于空白值時(shí),應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響,建立校正曲線予以修改。
基質(zhì)效應(yīng)的原因錯(cuò)綜復(fù)雜,有可能是樣品中存在的基質(zhì)導(dǎo)致原抗體的聯(lián)絡(luò)結(jié)合能力下降,便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。導(dǎo)致樣本值無(wú)法計(jì)算出數(shù)值,或許數(shù)值為負(fù)。
那我們?nèi)绾伪苊釫LISA實(shí)驗(yàn)中基質(zhì)效應(yīng)?
基質(zhì)效應(yīng)可以通過(guò)產(chǎn)品研發(fā)階段的優(yōu)化盡可能去消除的。通蔚生物針對(duì)ELISA產(chǎn)品研發(fā)進(jìn)行了多種優(yōu)化。ELISA試劑盒在開(kāi)發(fā)進(jìn)程中,標(biāo)準(zhǔn)品不選用人或動(dòng)物血清、血漿作為標(biāo)準(zhǔn)曲線的稀釋液,只能選用其仿照物。
我們量身定制的緩沖液系統(tǒng),這些優(yōu)化后的緩沖液體系能很好消除基質(zhì)效應(yīng)。還有當(dāng)檢測(cè)某個(gè)分析物時(shí),其他相關(guān)因子或類似結(jié)構(gòu)因子如果有非特異性結(jié)合,也會(huì)導(dǎo)致基質(zhì)效應(yīng),我們也因此做了大量的交叉反應(yīng),確保沒(méi)有明顯的交叉反應(yīng)和干擾。
而且我們?cè)噭┖斜仨毻ㄟ^(guò)嚴(yán)格的基質(zhì)效應(yīng)測(cè)試,全部包括線性稀釋和摻入回收率實(shí)驗(yàn),并把測(cè)試結(jié)果記錄在說(shuō)明書(shū)中。