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細胞培養(yǎng)的注意要點

日期:2024-12-22 10:54
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摘要:1.細胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的清洗及布局 ①保持細胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序,將所有物品置于直視范圍內(nèi)。 ②向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇,擦拭清潔。 ③在通風(fēng)櫥中部開闊處放置細胞培養(yǎng)容器;移液器置于右方易于取用;試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸??;試管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放廢液。 2.培養(yǎng)瓶/皿等物品的無菌操作 無菌培養(yǎng)瓶、試劑瓶、培養(yǎng)皿等物品使用時方可揭開蓋子,不得將其開放暴露于環(huán)境中,操作完成后盡快蓋上蓋子,取下蓋子時應(yīng)將蓋子開口朝下放在工作臺面上。進行無菌操作時不要說話、唱歌或吹口哨。盡快完成實驗,以盡量避免污染。 3.細胞培養(yǎng)中可能的污染物 細胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類: ①化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、增塑劑和去污劑。 ②生物污染物,如霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細胞系的交叉污染。 可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術(shù),降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。
細胞培養(yǎng)(cell culture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養(yǎng)條件等),使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說,細胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程,細胞培養(yǎng)本身就是細胞的大規(guī)模克隆。細胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞,這是克隆技術(shù)必不可少的環(huán)節(jié),而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。細胞培養(yǎng)技術(shù)是細胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù),通過細胞培養(yǎng)既可以獲得大量細胞,又可以借此研究細胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞的合成代謝、細胞的生長增殖等。
細胞培養(yǎng)過程中需要注意的一些要點,一起來看看吧。
1.細胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥的清洗及布局
①保持細胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥內(nèi)的整潔有序,將所有物品置于直視范圍內(nèi)。
②向放入通風(fēng)櫥內(nèi)的所有物品噴灑70%乙醇,擦拭清潔。
③在通風(fēng)櫥中部開闊處放置細胞培養(yǎng)容器;移液器置于右方易于取用;試劑和培養(yǎng)基置于右后方便于吸??;試管架置于中后部;小型容器置于左后部用于盛放廢液。
2.培養(yǎng)瓶/皿等物品的無菌操作
無菌培養(yǎng)瓶、試劑瓶、培養(yǎng)皿等物品使用時方可揭開蓋子,不得將其開放暴露于環(huán)境中,操作完成后盡快蓋上蓋子,取下蓋子時應(yīng)將蓋子開口朝下放在工作臺面上。進行無菌操作時不要說話、唱歌或吹口哨。盡快完成實驗,以盡量避免污染。
3.細胞培養(yǎng)中可能的污染物
細胞培養(yǎng)污染物主要分為兩類:
①化學(xué)污染物,如培養(yǎng)基、血清和水中的雜質(zhì)、增塑劑和去污劑。
②生物污染物,如霉菌、酵母、病毒、支原體以及其他細胞系的交叉污染。
可通過充分了解污染源以及采用良好的無菌技術(shù),降低污染發(fā)生的頻率和嚴(yán)重程度。